Nothing personal, just business
lena_boltik
дневник заведен 05-10-2003
постоянные читатели [24]
aslidhg, dimik, FerZ, fucker, indian, kostaq, Lev, LightSmoke, Lisenok, Logistech, Mirabelle, Mudak, Murk, Radu, Rocsi, yaponets, Букля_, Ино, Клуб АРХипелаг, ПАРАД УРОДОВ, Письма, Скромняга-2, Старший кладовщик, _Небо_
закладки:
цитатник:
дневник:
местожительство:
Казань, Россия
интересы [14]
антиресы [11]
02-06-2005 16:52
наверное такого еще никто не делал... я буду первой=) но тчобы перестраховаться, я кину сюда свою дипломную работу, на случай, если комп заглючит.
только громко не смейтесь=)
ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений………………………………………………………..
Введение……………………………………………………………………

Глава 1.
Обзор литературы…………………………………………………………
1.Биохимические аспекты и функциональная роль медь-содержащих аминооксидаз……………………………………………………………..
1.1. Молекулярные свойства бензиламиноксидазы………………….
1.2. Локализация бензиламиноксидазы……………………………….
1.3. Функциональная роль бензиламиноксидазы…………………….
1.4. SSAO проявляет подобные инсулину эффекты при метаболизме глюкозы……………………………………………………………………….
2. Бензиламиноксидаза при патологиях человека………………………….
2.1. Активность сывороточной семикарбазид-чувствительной аминоксидазы является независимым маркером атеросклероза сонной артерии……………....
2.2. Влияние активности семикарбазид-чувствительной аминоксидазы на цитотоксичность культуры эндотелиальных клеток человека………………….
2.3. Клонирование гена семикарбазид-чувствительной аминооксидазы……….
2.4. SSAO при кольцеобразной аортальной экстазии…………………………..
2.5.Семикарбазид-чувствительная аминооксидаза при диабете……………….
2.6. Семикарбазид-чувствительная аминооксидаза при сосудистых нарушениях……………………………………………………………………….
2.7. Активность бензиламиноксидазы при раке легкого……………………….

Глава 2.
Экспериментальная часть………………………………………………
Материалы и методы…………………………………………………………
2.1. Объекты исследования……………………………………………………
2.2. Используемые материалы………………………………………………….
2.3. Отбор биопсийного материала……………………………………………..
2.4. Определение ферментативной активность ВАО в плазме крови человека…………………………………………………………………………..
2.5.Определение кинетики образования бензил альдегида……………………..
2.6.Ингибиторный анализ……………………………………………………….

Глава 3.
Результаты исследований и обсуждение……………………………………
3.1. Сравнительный анализ уровня ВАО периферической крови пациентов в диагнозом «шизофрения» и условно здоровых людей…………………………
3.2. Гендерный анализ активности ВАО в популяции пациентов с диагнозом «шизофрения»……………………………………………………………………..
3.3. Сравнительный анализ кинетических параметров бензиламинооксидазной реакции в разных группах больных………………
3.4. Сравнительный ингибиторный анализ……………………………………

Выводы……………………………………………………………………….

Список литературы………………………………………………………………




Список сокращений:

АО - аминоксидаза
BAO – плазматическая бензиламиноксидаза
SSAO – тканевая семикарбазидчувствительная амноксидаза
АБТС – 2.2 азинобис (3-бензтиазолин) – 6 – сульфоновая кислота
БA – бензиламин HCl
ДФНГ – 2.4 – динитрофенил гидразин
Купризон - бис (циклогексанон) – оксалдигидразон
МАО А - моноаминоксидаза А
МАО В - моноаминоксидаза



ВВЕДЕНИЕ

Бензиламинооксидаза – плазматический гомеостазный фермент. Согласно современным представлениям функциями ВАО являются катаболизм нейромедиаторов аминной природы и процессинг эластина и гистамина. Повышенный или пониженный патологический уровень фермента отражает дисфункцию в регенерации внутриклеточных белковых компонентов в нервной и паренхиматозной тканях. Поэтому ВАО предполагается считать одним из маркеров патологии соединительной и нервной тканей.
Тканевая форма фермента называется семикарбазид-чуствительной аминоксидазой (SSAO), плазматическая – бензиламиноксидазой (ВАО). В крови ВАО связана с альбуминовой фракцией. SSAO, попадая из тканей в жидкости организма, становится циркулирующей и называется ВАО. Фермент обладает высокой аффиностью к бензиламину. (Buffoni et al., 2003).
Циркулирующие медьсодержащие АО (ВАО, SSAO), главным образом, рассматриваются как ферменты, участвующие в катаболизме циркулирующих аминов. Ряд авторов полагает, что главная функциональная роль ВАО в межклеточном матриксе - участие в процессинге проэластина, и способность оказывать влияние на протекание воспалительных процессов и контроль за целостностью межклеточного матрикса (созревание эластина) при воспалительном процессе. ( Langford S, Trent M.,1999).

Целью нашей работы являлось изучение ВАО в периферической крови пациентов с нейродегенеративными заболеваниями.

В связи с поставленной целью решались следующие экспериментальные задачи:
1. Сравнительный анализ уровня ВАО периферической крови пациентов в диагнозом «шизофрения» и условно здоровых людей.
2. Гендерный анализ активности ВАО в популяции пациентов с диагнозом «шизофрения».
3.Сравнительный анализ кинетических параметров бензиламинооксидазной реакции в разных группах больных.
4. Сравнительный ингибиторный анализ.




ГЛАВА 1


ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ


1. Биохимические аспекты и функциональная роль медь-содержащих аминооксидаз

Медьсодержащие аминоксидазы (ЕС1.4.3.6) (АО) широко распространены в природе. АО содержат медь в качестве активного центра и катализируют окислительное дезаминирование эндогенных аминов. Диамин оксидаза млекопитающих играет важную роль в метаболизме гистамина, а спермин оксидаза отвечает за метаболизм полиаминов. Однако, функциональная роль бензиламиноксидазы (ВАО) и тканевой семикарбазид - чувствительной аминоксидазы (SSАО) не установлена до конца.
SSAO, попадая из тканей в жидкости организма, становится циркулирующей и называется ВАО. Она обладает высокой аффиностью к бензиламину. В межклеточном матриксе фермент участвует в процессинге проэластина, и способен оказывать влияние на протекание воспалительных процессов (Buffoni et al., 2003).
AO являются распространенной группой ферментов. Они были найдены у животных, микроорганизмов и у растений. АО участвуют в катаболизме биогенных аминов. Эти ферменты делятся на два класса, в зависимости от того, что они используют в качестве окислительно-восстановительного кофактора FAD (или FMN; ЕС 1.4.3.4) или медь плюс 2,4,5-тригидрооксифенилаланин хинон (Cu-TPQ; ЕС 1.4.3.6) (Houen.,1999). АО катализируют один тип реакций, описанных в схеме 1 (Boomsma et al., 2000)

Схема 1.

TPQ является нетипичным кофактором хиноновой природы и образуется из тирозина. В отличие от FAD, TPQ обратимо связывается с субстратом (амином) и образует спектрально различимые промежуточные соединения, что позволяет изучать каталитический цикл при помощи спектральных методов (Klinman et al., 1994). Химическая структура TPQ в свободной (окисленной) и связанной с субстратом форме представлена на схеме 2, механизм этой реакции был показан на Cu-AO сыворотки крови быка (Dooley et al., 1991; Turowski et al., 1993).


Схема 2. Каталитический цикл получения ВSАО из TPQ.







1.1. Молекулярные свойства бензиламиноксидазы

Плазматическая медьсодержащая аминоксидаза млекопитающих представляет собой гликопротеин, состоящий из 2х субъединиц, соединенных с помощью дисульфидных связей, каждая связь присоединяет 1 г-атом восстановленной меди на 1 моль карбонил связанного кофактора. Молекулярная масса ВАО равна 97KДа (Buffoni et al, 1998).
Медь зависимые аминоксидазы млекопитающих гомологичны по молекулярному весу, наличию компонента меди и аминокислотным последовательностям.
Бензиламиноксидаза (E.C. 1.4.3.6) впервые была выделена из сердца свиньи. Вестерн блоттинг анализ показал, что фермент перекрестно реагирует с многоклональными антителами, полученными против гомогенной, кристаллической ВАО плазмы свиньи. Процедура очистки состояла из последовательного хроматографирования на DEAE-целлюлозе, DEAE-Sephadex, Кона А-Сефарозе, Sephadex 200 и колонке с гидроксиапатитом. Активность очищенного фермента составила 0.037 микромоль/мин-1мг-1 при 37оC, и Кm для бензиламина была 29 мкM. Фермент ингибировался карбонильными реактивами, такими как семикарбазид и альфа-аминогуанидин. Спектр комплекса фенилгидразина реагирует с бензиламиноксидазой в соотношении моль к молю с ферментом. Содержание меди составило 2 г/моль фермента. (Dowling, Cambi, 1998).
Плазматическая бензиламиоксидаза свиньи по аминокислотному составу гомологична фетуину.
Гликопротеин фетуин присутствует в сыворотке многих организмов (человека, овцы, свиньи, коровы). Функцией фетуина является стимуляция активности лимфоцитов. Также была показана способность фетуина вызывать более быстрый рост клеток в культуре (Dziegielewska et al., 1990).


1.2. Локализация бензиламиноксидазы

В настоящее время все больше данных появляется о локализации ВАО в организме млекопитающих. Известно, что у морской свинки наибольшая активность SSAO найдена в фибробластах. (Buffoni еt al, 2000). Тканевая форма SSAO локализована в плазматической мембране, и главным образом обнаруживается в сосудистых гладких миоцитах и адипоцитах. Недавние исследования показали, что SSAO может активизировать транспорт глюкозы в жировых клетках. (Mercier, Moldes, 2001).
Ochiai в соавторстве (2005) обнаружили высокий уровень SSAO в aдипоцитах. В сердце новорожденной крысы максимальный уровень SSAO обнаружен на 7 – 14 день после рождения. (Langford, Trent, Boor, 2002).
SSAO обнаружена в плазме крови и увеличена при диабете, и в частности у диабетических пациентов с сосудистыми осложнениями (Gokturk, Oreland, 2004).
Эндогенные субстраты и физиологическая функция SSAO не ясны, но известно, что самая высокая активность приходится на гладкие миоциты в сосудистой ткани стенке аорты у млекопитающих в стенке аорты. (Langford, Boor, 1999), (Gokturk et al, 2003). С другой стороны активность SSAO не обнаружена в гепатоцитах печени (Buffoni еt al, 2003)
Ряд авторов считает, что циркулирующая ВАО, возможно, секретируется из соединительной ткани. (Buffoni et al.,2003). Так, SSAO, аффинная к бензиламину была обнаружена в сердце человека. Значение Кm составило 278 ± 35,3 µМ, и V m - 114,7 ± 14,7 нмоль/мг*мин для бензиламина. Реакция подавлялась 1 мM гистамина и В24, специфического ингибитора SSAO.





1.3. Функциональная роль бензиламиноксидазы

Сперминоксидаза, диаминоксидаза и лизилоксидаза окисляют физиологические субстраты, и, следовательно, их физиологическая роль доказана. Существует большое количество разновидностей специфических АО. Хорошим субстратом для этих ферментов у млекопитающих является не физиологический амин - бензиламин. Физиологическими субстратами, как предполагают, является аминоацетон, метиламин, 2-фенилэтиамин, тирамин и дофамин (Buffoni et al.,2003; O’Sullivana et al., 2003). SSAO способны окислять 5-гидрокситриптамин и гистамин (O’Sullivana et al.,2003). Многие из этих субстратов также подвергаются окислительному дезаминированию АО класса Е.С. 1.4.3.4. (МАО), но аминоацетон и метиламин субстратами для МАО не являются (Tipton et al.,2001). SSAO катализирует так же окислительное дезаминирование множества ксенобиотиков. Несмотря на то, что SSAO часто расценивается как фермент, осуществляющий детоксикацию аминов, продукты его реакции потенциально более ядовиты, чем непосредственно сами аминные субстраты (Callingham et al., 1995).
Чистая кристаллическая свиная плазматическая ВАО участвует в окислении проэластина. Доказательство этого было получено в соединительной ткани всех органов. В них был найден протеин, который обладал такой же иммунологической детерминантой как и свиная плазматическая ВАО.
Антитела против чистой свиной плазмы ВАО реагируют с протеином, который представлен в фибробластах морских свинок и также в культуре человеческих фибробластов, из которых высвобождается активность ВАО в культуральную среду. Неспецифические и специфические ингибиторы SSAO in vivo в поврежденных тканях крысы, вызывают дезорганизацию архитектуры эластина в аорте и легких. Это является доказательством того, что чистая ВАО катализирует окисление проэластина (Langford et al.,1999).
SSAO из многих тканей различных видов животных катализирует окисление гистамина. Dabrowski et al считают, что гистамин увеличивает скорость синтеза коллагена. Следовательно, функциональная роль SSAO – это регуляция уровня гистамина в неклеточном матриксе, который выделяется соединительными клетками (Dabrowski et al., 1975).
Увеличение биосинтеза коллагена в печени вследствие хронического воспаления - хорошо известный процесс. Предполагают, что повышение содержания гистамина, встречающееся при повреждении печени, может коррелировать с биосинтезом коллагена. Показано, что увеличение активности SSAO в коже наблюдалось у морских свинок в течение всего процесса заживления раны и в течение процесса ангиогенеза в роговой оболочке глаза кролика.(Buffoni et al, 2000).
Циркулирующие медьсодержащие АО (ВАО,SSAO), главным образом, рассматриваются как ферменты, участвующие в катаболизме циркулирующих аминов. Ряд авторов полагает, что главная функциональная роль ВАО заключается в контроле за целостностью межклеточного матрикса (созревание эластина) при воспалительном процессе (Buffoni et al.,2003).
Другой, менее определенной функцией SSAO, является вовлечение некоторых белков в посттрансляционную модификацию, защиту миокарда сердца и в процессе модификации калиевых каналов нейрона. SSAO является также ферментом, подавляющим связывание аминопротеина в сердце крыс, но его значение не ясно (Wu et al., 1996; Mateescu et al.,1997).
Обнаружен белок, который вызывает адгезию лимфоцитов к клеткам эндотелия – VAP (vascular-adhesion protein). Показано, что VAP-1 является эндотелиальным гликопротеином, гомологичным по аминокислотной последовательности SSAO и обнаруживается параллельно с SSAO (Yoong et al., 1998).
Рядом ученых обнаружена уникальная активность SSAO в зубной пульпе и доказано участие фермента в метаболизме 5-гидрокситриптамина (5-HT). Предполагают, что фермент может играть определенную роль в развитии воспалительных ответов в зубной ткани. 5-HT стимулирует выход метаболитов арахидоновой кислоты в различные ткани, включая зубную пульпу, что может вызывать воспаление зубных нервов и являться основой формирования глубоких механических повреждений зуба (O’Sullivana et al., 2003).
SSAO миокарда не обладает высокой афинностью к бензиламину. Доказана индивидуальная вариабельность активности SSAO сердечной ткани. Наблюдалось повышение активности ВАО в плазме крови человека у кардиологических пациентов при сердечной недостаточности по сравнению со здоровыми людьми (Pino et al.,1998; McEwen и Harrison (2001).

1.4. SSAO проявляет подобные инсулину эффекты при метаболизме глюкозы

Рядом авторов было предложено несколько альтернативных функций SSAO. Предполагается, что одна из ролей SSAO заключается в формировании перекиси водорода, которая действует подобно инсулину в стимулирует транспорт глюкозы к поверхности клеток. Так же SSАО способна подавлять липолиз в адипоцитах (Morin et al., 2001).
Окисление бензиламина семикарбазид-чувствительной аминоксидазой стимулирует дифференциацию адипоцитов. (Mercier N, et al., 2001).
Субстраты SSAO – бензиламин или тирозин в присутствии ванадата стимулируют фосфорилирование тирозина в инсулиновых рецепторах субстратов IRS-1 и IRS-3 и повышают фосфотидилинозитол 3-киназную активность (PI 3-kinase) в жировых клетках. Кроме того, введение бензиламина и ванадата in vivo увеличивает толерантность глюкозы у недиабетических и диабетических крыс, диабет у которых был искусственно вызван стрептоцином. Также бензиламин и ванадат in vivo уменьшают гипергликемию у диабетических крыс.
Основываясь на этих наблюдениях, ряд авторов предполагает, что активность SSAO и ванадата очень схожа с эффектами инсулина в адипоцитах и проявляет антидиабетическое действие у животных, при сахарном диабете первого типа (Zorzanoa et al., 2003) (рис.2).





Рис. 2. Биологический эффект SSAO в адипоцитах.



2. Бензиламиноксидаза при патологиях человека.

2.1. Активность сывороточной семикарбазид-чувствительной аминоксидазы является независимым маркером атеросклероза сонной артерии.

На основании клинических и экспериментальных исследований, ряд авторов предполагает, что повышенная активность семикарбазид-чувствительной аминоксидазы и образование цитотоксических продуктов реакции (например, формальдегида и перекиси водорода) может играть важную роль при патогенезе атеросклероза. Установлена корреляция между повышенной активностью фермента и симптомами атеросклероза у больных диабетом.
У больных диабетом 2 типа ферментативная активность бензиламиноксидазы приблизительно на 50% превышает ферментативную активность ВАО у здоровых людей (Grounvall et al., 2001).
Значение активности ВАО свидетельствует о тяжести течения атеросклероза не только у больных диабетом 2 типа, но и у не диабетиков. На основании данного наблюдения авторы приходят к выводу, что повышенная активность бензиламиноксидазы может быть биохимическим маркером атеросклероза, при наличии факторов риска, таких как повышенное содержание холестерина, ожирение, сахарный диабет, гипертония у диабетиков. При изучении инсулин - зависимых диабетиков, более высокая активность фермента наблюдалась у пациентов с нефропатией (Weiss et al.,2003).
По-видимому, пол и курение не оказывают влияние на повышение активности SSAO. Однако другие авторы считают, что точная причина повышения активности SSAO не установлена (Kara´di et al.,2002).

2.2. Влияние активности семикарбазид-чувствительной аминоксидазы на цитотоксичность культуры эндотелиальных клеток человека

Рядом авторов была показана способность аллиламина вызывать сосудистые нарушения и атеросклеротическую болезнь у животных. Этот процесс объяснили особенностями метаболизма аллиламина. Аллиламин расщепляется до токсического альдегида - акролеина, который катализируется SSAO, присутствующей в плазме крови и гладкой мускулатуре сосудов.
Токсичность аллиламина и акролеина исследовали на культивируемых клетках пупочной вены человека. После 20-часовой обработки культивируемых клеток 50 мкМ аллиламина жизнеспособность клеток не изменилась, а при концентрации 100 мкМ аллиламина жизнеспособность клеток значительно снижалась. Обе концентрации аллиламина вызывали выраженную гибель клеток. Цитотоксический эффект 50 мкМ аллиламина не изменялся в присутствии ингибитора МАО - паргилина (100 мкМ), но полностью исчезал в присутствии 100 мкМ семикарбазида - ингибитора SSAO и пропаргиламина - ингибитора МАО и SSAO. Aкролеин в концентрациях 50 и 100 мкМ оказывал сильное цитотоксическое действие, но был малоэффективен в концентрациях 5 и 10 мкМ. Поскольку SSAO участвует в метаболизме биогенного алифатического амина - метиламина до формальдегида, изучались эффекты последнего на культуру клеток пупочной вены. Формальдегид в дозе 50 мкМ незначительно влиял на жизнеспособность клеток, а в дозе 200 мкМ формальдегид вызывал статистически значимое уменьшение жизнеспособности. Цитотоксичность формальдегида в дозе 200 мкМ резко возрастала на культуре клеток пупочной вены, инкубированных 24 часа с ингибитором синтеза глутатиона (GSH) D,L-бутионин сульфоксимином в концентрации 200 мкМ. Предполагается, что целостность эндотелия и кровеносных сосудов может изменяться под действием данных алифатических альдегидов, присутствующих в качестве пищевых примесей, а также возможных продуктов метаболизма, в том числе биогенных и ксенобиотическиех алифатических аминов (Pino et al.,1996).



2.3. Клонирование гена семикарбазид-чувствительной аминооксидазы

Кодирующая последовательность ДНК для SSAO описана для многих видов млекопитающих. Японские ученые изолировали SSAO кодирующую ДНК из аорты крысы и исследовали экспрессию мРНК с помощью ПЦР. Установленная аминокислотная последовательность оказалась гомологичной у человека и крысы. 80% соответствие крысиной и человеческой SSAO. Экспрессия мРНК была обнаружена во многих тканях крысы. (Ochiai et al., 2005).
Были клонированы некоторые изоферменты SSAO человека. Ряд ученых исследовали человеческую плацентарную и почечную активность SSAO. Было показано 65% соответствие на белковом уровне. Человеческая плацентарная SSAO, также на 36% была схожа с человеческой почечной диаминоксидазой. Кроме того, были идентифицированы 2 гена, кодирующих SSAO бычьего легкого и SSAO сыворотки быка. Первичные последовательности этих двух генов схожи на 91 %. Человеческая плацентарная SSAO показывает высокое сходство с SSAO бычьего легкого и SSAO сыворотки быка на 81% и 79%, соответственно. (Zorzanoa et al., 2003).





2.4. SSAO при кольцеобразной аортальной экстазии

Лизилоксидазы, которые являются представителями семейства аминооксидаз, вовлечены в созревание волокон коллагена. Существуют белки, которые, по мнению авторов, ответственны за образование коллагенового волокна. В исследовании были использованы аортальные ткани, полученные в хирургии. SSAO и LAO были исследованы иммуногистопатологической и софокусной микроскопией. Определение этих белков важно для клинического и особенно гистоморфологического исследования артериальной стенки. В аорте контрольных образцов, окрашивание SSАО проходило в области эластичных мембран, тогда как в аневризматических областях, SSAO было заметно менее окрашено. Тяжелая цепь гладкой миозиновой мускулатуры была также уменьшена в аневризматических областях по сравнению с контролем, указывая на дедефференциацию эластичных мембран. Доказали, что клинические особенности таких болезней как аневризма и аортальный недостаток напрямую зависят от концентрации SSAO. Однако, уменьшение или полный дефицит активности SSAO сказывается на фрагментации упругих волокон и сосудистой сердечной гладкой мускулатуре. (Sibon et al, 2004).



2.5.Семикарбазид-чувствительная аминооксидаза при диабете

SSAO обнаружена в плазме крови и увеличена при диабете, и в частности у диабетических пациентов с сосудистыми осложнениями. Предполагалось, что от уровня SSAO зависит развитие сосудистых осложнений. Ученые исследовали трансгенных мышей с диабетом, определяя SSAO в гладких миоцитах. Оценка активности SSAO была выражена с помощью ПЦР in vivo. Диабет вызвал увеличение активности SSAO в сыворотке, почке, и жировой ткани трансгенных животных. Увеличенная деятельность SSAO в диабете наиболее вероятно зависит от посттранскрипционных модификаций или активации существующих, но бездействующих молекул фермента. (Gokturk et al, 2004).
Недавние исследования показали, что SSAO может активизировать транспорт глюкозы в жировых клетках. Показано влияние активности SSAO на созревание адипоцитов из пре-адипоцитных клеткок 3T3-L1. Слияние 3T3-L1 пре-адипоцитов и метиламина - физиологического субстрата SSAO - привело к быстрому созреванию и дифференцировке адипоцитов. Предполагается, что эффект слияния может быть связан с активацией SSAO, так как реакция происходила в присутствии ингибитора SSAO – семикарбазида. Кроме того, созревание адипоцитов было вызвано метиламином. Клетки 3T3-L1 были обработаны другими субстратами SSAO. Обработка метиламина каталазой показала, что перекись водорода, произведенная SSAO, также привела к более быстрому созреванию адипоцитов. Предполагают, что SSAO может внести свой вклад в развитие ткани адипоцитов. (Мechier et al, 2001).




2.6. Семикарбазид-чувствительная аминооксидаза при сосудистых нарушениях

Группой ученых было доказано, что SSAO вносит свой вклад в развитие гиперпластической ангиомы. Чтобы исследовать ненормированно повышенную SSAO в сосудистых тканях in vivo, получили трансгенную модель человеческого SSAO в мышах. Использовался гладко-мышечный промотер, специфичный для альфа-актинового волокна - 8 (SMP8). Было подтверждено повышенное содержание трансгенного человеческого SSAO в тканях сердечной мускулатуры. Ферментативный анализ гомогената из сосудистых тканей сердца трансгенных животных показал повышенный уровень содержания SSAO по сравнению с нетрансгенными тканями. Проанализировав плазменное содержание SSAO, выяснили, что более высокое содержание SSAO было обнаружено в плазме мышей контроля, что указывает на тот факт, что плазменный SSAO может произойти из клеток гладкой мускулатуры. Гистопатологическая оценка аорты и почечной артерии у трансгенных мышей показала измененную структуру эластина. Вместо эластичных миоцитов, которые присутствовали в аорте и почечной артерии, миоциты у опытных мышей были прямыми и развернутыми, с нерегулярно встроенными волокнами и формировали запутанные сети. Предполагается, что содержание SSAO привело к уменьшению эластичности артерий и изменению структуры эластина. Кроме того, артериальное давление у SMP8 трансгенных мышей было значительно ниже по сравнению с нетрансгенными особями. Авторы пришли к выводу, что трансгенные мыши имели дефект в способности регулировать кровяное давление. (Gokturk C, Nilsson J., 2003).
Langford, Trent, 1999 показали, что самая высокая активность семикарбазид-чувствительных АО приходится на гладкие миоциты в сосудистой стенке аорты у млекопитающих и исследовали понижение активности SSAO стенки аорты крысы in vivo. У крыс вызывали быстрое и поэтапное понижение активности фермента с помощью семикарбазид гидрохлорида и аллиамин производными MDL-72274 или MDL-72145 Обработка этими составами привела к быстрому (6 и 24 ч) и поэтапному (21 день) понижению активности SSAO в аорте и легком. Понижение SSAO вызвало небольшое понижение активности лизилоксидазы. При понижении активности SSAO произошла дезорганизация архитектуры эластина в пределах аортальных миоцитов, сопровождаемых дегенеративным изменением в сосудистых гладких миоцитах. Никаких существенных различий между компонентами коллагена и эластина не было найдено как у животных с постоянно пониженным уровнем SSAO и животными контроля. Однако, количество зрелого эластина было понижено, а зрелый коллаген был повышен в аортах животных, обработанных семикарбазидом. Сосудистые повреждения и расширение грудной аорты, следуют за понижением активности SSAO in vivo. Предполагается, что SSAO играет важную роль в созревании соединительной ткани и в созревании нормального эластина.


2.7. Активность бензиламиноксидазы при раке легкого

Группа ученых показала, что SSAO катализирует дезаминирование аминогруппы первичных моноаминов и, предположительно, может быть фактором риска при сосудистых заболеваниях, например, сосудистые осложнения при диабете. Исследовали активность ВАО у пациентов с диагнозом «рак легкого». Вторичные цели состояли в том, чтобы исследовать, если есть корреляция эндотелиальными факторами роста (VEGF) и основным фактором роста фибробласта (bFGF). В исследовании использовали 231 образец сыворотки. Обнаруживаемые уровни bFGF, VEGF, и ВAO были найдены у всех пациентов. Сывороточная активность ВАО не была статистически связана с наличием болезни (p = 0.35). Существенная статистическая корреляция обнаружена между активностью ВАО и VEGF (p <0.0001), но никакой зависимости между активностью ВАО и bFGF не выявлено. Авторы считают, что наличие активности ВAO не связана с наличием у пациентов рака легкого. Однако, корреляция между сывороточной активностью ВАО и ангиогенетическим фактором и VEGF идентифицирована. (Garpenstrand et al, 2004).




жалко картинки сюда все не смогу прикрепить=)))))) а их тоже тьма=))))

Ваш комментарий:
Камрад:
Гость []
Комментарий:
[смайлики сайта]
Дополнительно:
Автоматическое распознавание URL
Не преобразовывать смайлики
Cкрыть комментарий
Закрыть